Приказ Министерства сельского хозяйства Российской Федерации от 18.03.2016 № 102

 



       МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

                              ПРИКАЗ

                              Москва

     18 марта 2016 г.                                   № 102


       Об утверждении условий применения биотехнологических
     методов искусственного осеменения племенных коров и телок

          Зарегистрирован Минюстом России 21 июля 2016 г.
                      Регистрационный № 42932

     В соответствии  с  пунктом  5.2.11  Положения  о  Министерстве
сельского    хозяйства    Российской    Федерации,    утвержденного
постановлением  Правительства  Российской  Федерации   от   12 июня
2008 г.  № 450  (Собрание  законодательства  Российской  Федерации,
2008,  № 25,  ст. 2983;  № 32,  ст. 3791;  № 42,  ст. 4825;   № 46,
ст. 5337; 2009, № 1, ст. 150;  № 3,  ст. 378;  № 6,  ст. 738,  № 9;
ст. 1119; ст. 1121; № 27,  ст. 3364;  № 33,  ст. 4088;  2010,  № 4,
ст. 394;  № 5,  ст  538;  № 16,  ст. 1917;  № 23,  ст. 2833;  № 26,
ст. 3350; № 31 ст. 4251,  4262;  № 32,  ст. 4330;  № 40,  ст. 5068;
2011, № 6, ст. 888; № 7, ст. 983; № 12, ст. 1652;  № 14,  ст. 1935;
№ 18,  ст. 2649;  № 22  ст. 3179;  № 36.  ст. 5154;   2012,   № 28,
ст. 3900; № 32, ст. 4561; № 37,  ст. 5001;  2013,  № 10,  ст. 1038,
№ 29, ст. 3969; № 33, ст.4386; № 45, ст. 5822; 2014, № 4,  ст. 382;
№ 10, ст. 1035; № 12, ст. 1297; № 28, ст. 4068; 2015, № 2, ст. 491;
№ 11 ст. 1611, № 26,  ст. 3900;  № 35,  ст. 4981;  № 38,  ст. 5297;
№ 47, ст. 6603; 2016, № 2, ст.325), п р и к а з ы в а ю:
     утвердить  условия   применения   биотехнологических   методов
искусственного  осеменения  племенных  коров   и   телок   согласно
приложению.


     Министр                                             А.Н.Ткачев


                           _____________


                                                Приложение
                                       к приказу Минсельхоза России
                                        от 18 марта 2016 г. № 102


                              УСЛОВИЯ
       применения биотехнологических методов искусственного
                осеменения племенных коров и телок

                        I. Общие положения

     1.1. В  целях  формирования   высокопродуктивного   племенного
поголовья крупного рогатого  скота,  повышения  племенной  ценности
племенных животных  при  разведении  племенного  крупного  рогатого
скота  организациями  по  племенному   животноводству   применяются
биотехнологические методы искусственного осеменения племенных коров
и телок (далее соответственно - коровы, телки).
     1.2. Искусственному  осеменению  подлежат  только   клинически
здоровые  коровы  и  телки.  Противопоказаниями  к  их   осеменению
являются:
     незавершенная инволюция матки;
     патология яичников;
     воспалительные процессы  в  половых  путях,  характеризующиеся
отклонениями в консистенции  слизи,  наличием  в  слизи  хлопьев  и
прожилок гноя.

     II. Определение времени искусственного осеменения коров и
                               телок

     2.1. При определении времени искусственного осеменения коров и
телок учитываются стадии полового цикла - течка, общее возбуждение,
половая охота и овуляция.
     2.2. Признаки   половой   охоты   и   времени   искусственного
осеменения коров и телок определяются в соответствии с  приложением
№ 1 к  настоящим  условиям  применения  биотехнологических  методов
искусственного  осеменения  племенных  коров   и   телок   (далее -
Условия).
     2.3. Выявление  у  коров  и  телок  половой  охоты  проводится
оператором по искусственному осеменению не менее 3 раз в  сутки:  в
утренние и дневные часы - при активных  прогулках  или  пастьбе,  в
вечерние часы - во время доения и ухода  за  животными  (на  каждое
наблюдение должно быть выделено не менее 15 минут).
     2.4. Основные способы выявления половой охоты у коров и  телок
определены в соответствии с приложением № 2 к Условиям.

            III. Хранение, оттаивание и оценка качества
                    глубокозамороженной спермы

     3.1. Глубокозамороженная сперма  должна  храниться  в  сосудах
Дьюара  в  жидком  азоте  при  температуре - 196°С.  Контейнеры  со
спермой обязательно должны быть погружены в жидкий  азот.  Хранение
спермы в парах азота недопустимо.
     3.2. Использование канистр с решетчатым дном  допускается  при
наличии специальных пластиковых стаканов-вкладышей.
     3.3. Глубокозамороженная    сперма    должна    храниться    в
металлических либо пластиковых контейнерах.
     3.4. Объем жидкого азота в сосуде Дьюара должен составлять  не
менее 1/3 объема сосуда. Уровень азота в сосуде Дьюара определяют с
помощью мерной линейки.
     3.5. Повторное замораживание спермы  после  ее  оттаивания  не
допускается.
     3.6. Оттаивание  глубокозамороженной  спермы   и   оценка   ее
качества    проводятся    в    соответствии    с    нижеприведенной
последовательностью   действий    оператора    по    искусственному
осеменению:
     надеть чистую спецодежду;
     вымыть стол и руки;
     снять чехол с микроскопа;
     протереть и подготовить микроскоп к работе;
     отрегулировать освещение,  подключить  нагревательный  столик,
разместить на нем предметные и покровные стекла;
     подготовить водяную баню  с  температурой  +38-40°С  (контроль
температуры осуществляется с помощью термометра);
     на чистый стол поставить тампонницу с тампонами,  пропитанными
70% спиртом<1>;
     на  край  стола  положить  перчатки,   канцелярские   скрепки,
пипетки, ампулы, салфетки и другие инструменты  для  искусственного
осеменения,    необходимые    согласно    применяемой    технологии
искусственного осеменения;
     достать пинцетом 1-й тампон, обработать пальцы рук  и  рабочую
(свободную) часть стола, тампон выбросить;
     достать пинцетом 2-й тампон, обработать подставку,  установить
ее на рабочую часть стола, тампон выбросить;
     взять 3-й тампон и обработать инструменты  для  искусственного
осеменения и ампулу или флакон  с  0,9%  раствором  цитрата  натрия
(изотон), тампон выбросить;
     обработанные   инструменты   для   искусственного   осеменения
разместить на подставке;
     вскрыть ампулу или флакон  с  0,9%  раствором  цитрата  натрия
(изотон)  и  поместить  в  водяную  баню  или   на   нагревательный
электростолик  для  разогрева  на   3   минуты   (кроме   работ   с
облицованными гранулами).
     При оттаивании спермы в соломинках:
     взять 4-й  тампон  и  обработать  край  пакета  с  одноразовым
инструментом для искусственного осеменения, тампон выбросить;
     угол пакета надрезать стерильными ножницами и выдвинуть  чехол
на 1/3 длины;
     надеть защитные очки и перчатки;
     открыть сосуд Дьюара,  быстро  (не  более  5 секунд)  охладить
бранши стерильного пинцета (корнцанга) в жидком азоте  и  подтянуть
контейнер с соломинками к верхней трети горловины сосуда;
     извлечь  стерильным,  предварительно   охлажденным   в   азоте
пинцетом или корнцангом одну соломинку;
     удалить колебательными  движениями  остатки  азота  (не  более
5 секунд) и немедленно погрузить соломинку в водяную баню;
     закрыть и опустить контейнер с оставшимся соломинками в  сосуд
Дьюара;
     закрыть сосуд Дьюара;
     медленно, круговыми движениями перемещать погруженную  в  воду
соломинку, держа ее  неохлажденным  пинцетом  за  запаянный  кончик
соломинки (соломинку, укупоренную стеклянными шариками, - за  любой
кончик). Оттаивание спермы следует проводить  в  течение  10 секунд
при температуре воды +38°С;
     вынуть из воды соломинку и осушить ее стерильной салфеткой;
     взять инструмент для искусственного осеменения в одну руку,  а
соломинку с оттаянной спермой в другую;
     проверить, чтобы  воздушный  пузырек  находился  у  запаянного
кончика соломинки (у соломинки, укупоренной стеклянными шариками, -
у любого кончика); при необходимости соломинку встряхнуть;
     оттянуть поршень инструмента для искусственного осеменения  на
90 - 120 мм (в зависимости от длины соломинки) и вставить соломинку
со спермой (укупорочным пыжом или шариком к поршню инструмента  для
искусственного осеменения) до упора;
     отрезать стерильными ножницами выступающий конец соломинки  на
расстоянии 7 мм строго перпендикулярно через воздушный пузырек;
     надеть  на  подготовленный   инструмент   для   искусственного
осеменения  защитный  чехол  и   надежно   зафиксировать   его   на
инструменте для искусственного осеменения;
     закрепить зажимом  (канцелярской  скрепкой)  надрезанный  край
пакета.
     При оттаивании спермы в необлицованных гранулах:
     взять 4-й тампон  и  обработать  край  пакета  с  одноразовыми
пипетками (катетерами), тампон выбросить;
     надрезать угол пакета стерильными ножницами или проколоть  его
концом пипетки (катетера);
     выдвинуть пипетку (катетер) на 1 - 3 длины, соединить  ее  при
помощи  муфты  со  стерильным   инструментом   для   искусственного
осеменения (или с полиэтиленовой ампулой);
     извлечь собранный инструмент для искусственного осеменения  из
пакета и разместить на подставке. Открытый  угол  пакета  закрепить
зажимом (канцелярской скрепкой);
     надеть защитные очки и перчатки;
     открыть сосуд Дьюара,  быстро  (не  более  5 секунд)  охладить
бранши стерильного пинцета (корнцанга) в жидком азоте  и  подтянуть
контейнер с гранулами к верхней трети горловины сосуда;
     извлечь  стерильным,  предварительно   охлажденным   в   азоте
пинцетом или корнцангом гранулу  и  опустить  ее  в  подготовленную
ампулу или флакон с 1 мл 2,9% раствора цитрата натрия (изотон);
     закрыть и опустить контейнер с оставшимися гранулами  в  сосуд
Дьюара;
     закрыть сосуд Дьюара;
     оттаивать   гранулу   при   температуре   +40°С   в    течение
8 - 10 секунд до тонкого ледяного стерженька;
     осторожными круговыми движениями  флакона  перемешать  сперму,
поставить флакон на стол на салфетку;
     набрать сперму в инструмент для искусственного осеменения.
     При оттаивании спермы в облицованных гранулах:
     взять 4-й  тампон  и  обработать  край  пакета  с  одноразовым
инструментом для искусственного осеменения, тампон выбросить;
     вскрыть угол пакета;
     надеть защитные очки и перчатки;
     открыть сосуд Дьюара,  быстро  (не  более  5 секунд)  охладить
бранши стерильного пинцета (корнцанга) в жидком азоте  и  подтянуть
контейнер с  облицованными  гранулами  к  верхней  трети  горловины
сосуда;
     облицованную  гранулу  быстро   извлечь   из   сосуда   Дьюара
стерильным, предварительно охлажденным пинцетом с широкими браншами
или корнцангом и поместить ее в водяную баню при температуре +38°С;
     оттаивать в течение 8 - 10 секунд;
     осушить  гранулу  стерильной  салфеткой  и  проверить  ее   на
герметичность путем  легкого  сжатия  между  двумя  пальцами  руки.
Негерметичные гранулы не использовать;
     подготовленную   гранулу   заправить    в    инструмент    для
искусственного осеменения;
     проколоть облицованную гранулу перед искусственным осеменением
стерильной иглой.
     _____________
     <1> При   работе   визоцервикальным   способом   дополнительно
используются тампонницы с тампонами, пропитанными 96% спиртом.

     3.7. Недопустимо оттаивать одновременно две и более доз.
     3.8. С момента оттаивания до введения спермы в половые  органы
животного должно пройти не более 15 минут.
     3.9. Оценка качества спермы проводится при  температуре  +38°С
на    нагревательном    столике    под    микроскопом,     соблюдая
последовательность действий оператора по искусственному осеменению:
     на предварительно подогретое предметное стекло из  инструмента
для искусственного осеменения нанести каплю спермы. К капле  спермы
из соломинки добавить стеклянной палочкой каплю 2,9% цитрата натрия
(изотон), смешать, накрыть подогретым покровным стеклом (при оценке
качества спермы в необлицованных и облицованных гранулах капля 2,9%
цитрата натрия (изотон) не добавляется);
     подвижность сперматозоидов определить при помощи микроскопа (с
увеличением в 120 - 200 раз)  по  10-балльной  шкале  в  нескольких
полях зрения.
     Для  искусственного  осеменения  коров  и  телок  используется
сперма с оценкой не менее 4 баллов, то есть 4 из 10  сперматозоидов
должны  иметь  прямолинейно-поступательное  движение.  Другие  виды
движения  сперматозоидов  (манежное,  колебательное)   при   оценке
качества спермы по балльной системе не учитываются. От высокоценных
быков-производителей и улучшателей, а также от быков,  происходящих
от родителей, признанных улучшателями, допускается к  использованию
сперма с оценкой не менее 3 баллов.

      IV. Технология искусственного осеменения коров и телок

     4.1. Искусственное осеменение  коров  и  телок  при  привязном
содержании, проводится в стойлах, при беспривязном  содержании -  в
специально оборудованных станках.
     4.2. Перед  искусственным  осеменением  коров   и   телок   от
фекальных масс освобождается  прямая  кишка,  тщательно  обмываются
теплой  водой  корень  хвоста  и  наружные  половые  органы,  затем
орошаются теплым раствором фурацилина и насухо вытираются бумажными
полотенцами. После  проведения  данных  мероприятий  оператором  по
искусственному осеменению руки моются и дезинфицируются 70% спиртом
или  раствором  фурацилина.   Во   время   проведения   туалета   и
обследования вульвы дополнительно используются латексные перчатки.
     4.3. При переносе инструмента для искусственного осеменения  к
месту  искусственного  осеменения  на  него  надевается  санитарная
рубашка,  либо  он  помещается  в   перчатку   для   искусственного
осеменения. В холодное время года используется термочехол.
     4.4. Искусственное  осеменение  коров   и   телок   проводится
следующими   методами:   ректоцервикальный,    маноцервикальный<2>,
визоцервикальный.
     _____________
     <2> Для  искусственного  осеменения   телок   маноцервикальный
способ не применяется.

     4.5. При ректоцервикальном  методе  искусственного  осеменения
сперма при помощи стерильных инструментов для осеменения вводится в
шейку матки через влагалище, с фиксацией шейки матки  через  прямую
кишку,   соблюдая   последовательность   действий   оператора    по
искусственному осеменению:
     надеть полиэтиленовую перчатку, смазать  поверхность  перчатки
вазелином (гелем), ввести руку вращательными движениями,  в  прямую
кишку и провести легкий массаж матки, нажимая  введенной  в  прямую
кишку  рукой  на  верхний  свод  преддверия  влагалища,  приоткрыть
половые губы и, не касаясь их концом инструмента для искусственного
осеменения,  ввести  его  на  10 - 15  см  под   углом   20° - 30°,
одновременно  указательным  и   средним   пальцем   руки   стягивая
санитарную рубашку с инструмента для искусственного  осеменения,  и
только затем продвинуть инструмент  для  искусственного  осеменения
горизонтально к шейке матки;
     зафиксировать каудальную  часть  шейки  матки  одним  из  трех
способов: кистью  руки;  между  указательным  и  средним  пальцами;
ладонью, прижав шейку матки к лонным костям, если двумя предыдущими
способами  зафиксировать  шейку  матки  не  удается  (во  избежание
травмирования прямой кишки фиксация шейки матки в период напряжения
стенки прямой кишки не допустима);
     фиксируя рукой шейку матки, продвинуть  ее  несколько  вперед,
расправляя  складки   во   влагалище,   переводя   инструмент   для
искусственного  осеменения  в  горизонтальное  положение  и   также
продвигая его вперед;
     контролируя отверстие канала шейки матки большим  пальцем  или
мизинцем (в зависимости от способа фиксации), ввести инструмент для
искусственного осеменения в канал;
     захватить шейку матки всей ладонью, приподнять над дном таза и
осторожными движениями вправо, влево, вверх, вниз надвинуть  ее  на
инструмент  для  искусственного  осеменения,  контролируя  пальцами
положение, продвинуть его в шейку матки  на  глубину  6 - 8  см  до
выхода в тело матки;
     медленно надавить на поршень, вытолкнуть сперму,  одновременно
слегка  отодвигая  назад  кончик  инструмента  для   искусственного
осеменения, равномерно распределяя сперму по каналу шейки матки;
     осторожно извлечь инструмент для искусственного осеменения  из
влагалища, при использовании ампулы  не  разжимать  ее  до  момента
извлечения  инструмента  для  искусственного  осеменения  из  шейки
матки;
     сделать легкий массаж шейки матки и  вывести  руку  из  прямой
кишки;
     утилизировать  использованный   одноразовый   инструмент   для
искусственного осеменения и перчатку;
     после искусственного осеменения животных необходимо  выдержать
в станке 1 - 2 часа.
     4.6. При  маноцервикальном  методе  искусственного  осеменения
сперма вводится в шейку матки  рукой  через  влагалище  при  помощи
стерильного инструмента  для  искусственного  осеменения,  соблюдая
последовательность действий оператора по искусственному осеменению:
     надеть полиэтиленовую  перчатку,  смочить  ее  0,9%  раствором
хлорида  натрия  (физиологическим  раствором)  или   1%   раствором
бикарбоната натрия (содовым раствором);
     осторожно ввести руку во влагалище коровы и определить степень
раскрытия шейки матки, сделать массаж шейки матки;
     вынув наполовину кисть руки из влагалища, вложить в нее другой
рукой  подготовленный  инструмент  для  искусственного  осеменения,
ввести кисть руки до шейки  матки  и  под  контролем  указательного
пальца   продвинуть  катетер   в   канал  шейки  матки  на  глубину
1,5 - 2 см;
     массируя шейку матки кончиками  пальцев,  ампулу  подталкивать
ладонью до тех пор, пока катетер полностью (на 6 - 7 см) не  войдет
в канал шейки матки;
     приподнять ампулу на 2 - 3 см вверх и выдавить из  нее  сперму
большим и указательным пальцами, начиная с верхнего  угла  донышка,
перемещая давление к шейке ампулы;
     после полного введения семени, извлечь катетер из канала шейки
матки не разжимая ампулу и, оставив инструмент  для  искусственного
осеменения на  дне  влагалища,  дополнительно  помассировать  шейку
матку в течение 1 - 2 минут;
     извлечь руку с инструментом для искусственного  осеменения  из
влагалища;
     утилизировать  одноразовый   инструмент   для   искусственного
осеменения и перчатку.
     4.7. При визоцервикальном  способе  искусственного  осеменения
сперма вводится в канал шейки матки с  использованием  влагалищного
зеркала,  соблюдая   последовательность   действий   оператора   по
искусственному осеменению:
     перед искусственным осеменением влагалищное зеркало  подогреть
до температуры 38 - 40°С, осветитель тщательно протереть  тампоном,
пропитанным 96% спиртом, оросить осветитель и  влагалищное  зеркало
непосредственно перед искусственным осеменением теплым  (38 - 40°С)
0,9% раствором хлорида натрия (физиологическим раствором);
     надеть полиэтиленовую перчатку;
     раскрыть половые губы, держа влагалищное зеркало с осветителем
ручками в сторону, ввести его  во  влагалище  до  упора.  Повернуть
влагалищное  зеркало  ручками  вниз  и  осторожно  раскрыть  ветви,
отыскать  шейку  матки  и  ввести  в  ее   канал   инструмент   для
искусственного осеменения на глубину 4 - 6 см.
     4.7.1. При визоцервикальном методе  искусственного  осеменения
коров   и   телок   можно   использовать   любой   инструмент   для
искусственного осеменения,  кроме  катетера  для  маноцервикального
способа,  соблюдая   последовательность   действий   оператора   по
искусственному осеменению:
     медленно ввести сперму и извлечь инструмент для искусственного
осеменения;
     осторожно повернув влагалищное зеркало ручками в стороны, с не
полностью сомкнутыми ветвями, извлечь его из влагалища;
     утилизировать  одноразовый   инструмент   для   искусственного
осеменения и перчатку.
     Влагалищное зеркало после осеменения  каждой  коровы  и  телки
обмывается  теплой  кипяченой  водой,   моется   теплым   2 - 3%-ым
раствором  бикарбоната   натрия   (содовым   раствором)   и   затем
обеззараживается кипячением или фламбированием.
     4.8. Для  искусственного  осеменения  коров  и   телок   могут
использоваться зеркала различных размеров.

     V. Подготовка инструментов для искусственного осеменения,
        материалов, растворов и дезинфекция сосудов Дьюара

     5.1. Инструменты для  искусственного  осеменения  и  материалы
следует стерилизовать одним из следующих способов: кипячение, сухой
жар,     фламбирование     (обжигание     некоптящим     пламенем),
автоклавирование,  обработка  химическими   средствами,   облучение
ультрафиолетовыми лучами.
     Кипячением   стерилизуются    стеклянные    и    металлические
инструменты для  искусственного  осеменения.  Для  этого  тщательно
промытые   инструменты   для    искусственного    осеменения    при
необходимости разбираются, помещаются в стерилизатор, заливаются на
2/3 объема дистиллированной водой, закрываются  крышкой,  доводятся
до кипения и кипятятся в течение 20 минут, а  потом  остужаются  не
снимая   крышки.   Инструменты   для   искусственного    осеменения
извлекаются  стерильным  пинцетом.  В   них   вставляются   поршни,
инструменты  для   искусственного   осеменения   заворачиваются   в
стерильные салфетки. Остатки воды с инструментов для искусственного
осеменения удаляются стерильными  салфетками.  Влагалищные  зеркала
стерилизуются  отдельно  от  посуды   и   иных   инструментов   для
искусственного осеменения.
     Сухим   жаром   стерилизуются   стеклянные   инструменты   для
искусственного осеменения, вата и марля. Стерилизация проводится  в
сушильном шкафу при температуре + 160°С в течение 1 часа  30  минут
или при +180°С в течение часа. Срок стерилизации  начинает  течь  с
момента,  когда  температура  в   шкафу   достигает   вышеуказанных
значений. Перед началом стерилизации инструменты для искусственного
осеменения, вата или марлевые салфетки обворачиваются  пергаментной
бумагой  или  фольгой.  Чистые  сухие  колбы,  флаконы  накрываются
фольгой или пергаментной  бумагой,  которые  закрепляются  нитками.
Окончив стерилизацию, сушильный шкаф  выключается,  но  открывается
только после остывания до +50 ... +60°С.
     Фламбирование применяется с целью  стерилизации  металлических
инструментов для искусственного осеменения, но только в том случае,
когда   отсутствует   возможность   простерилизовать   их   другими
способами. Для обжигания можно использовать газовую плиту,  примус,
спиртовку или тампон, пропитанный 96%-ым спиртом.
     Автоклавирование используется  для  стерилизации  инструментов
для искусственного осеменения из полимерных материалов,  растворов,
хлопчатобумажной  спецодежды,  салфеток,  полотенец.   Стерилизация
проводится в автоклавах согласно инструкциям по их применению.
     Использованные предметные и покровные стекла моются  в  теплой
воде и протираются марлевой салфеткой.
     Стерильные инструменты для искусственного осеменения  хранятся
в застекленных шкафах или в настольном ящике-витрине, оборудованном
бактерицидной  лампой.  Хранить  инструменты   для   искусственного
осеменения на столе под марлей запрещено.
     Инструменты для искусственного осеменения, предназначенные для
использования  на  пастбище,   после   стерилизации   оборачиваются
стерильными марлевыми салфетками, затем  полиэтиленовой  пленкой  и
укладываются в сумку. Еженедельно сумка  моется  горячим  раствором
бикарбоната натрия (содовым  раствором),  прополаскивается  горячей
водой. При возвращении из хозяйства, находящегося на территории, не
являющейся  благополучной  по  болезням,  общим  для   человека   и
животных, данные процедуры осуществляются немедленно  в  специально
отведенном месте.
     5.2. При  искусственном   осеменении   используются   растворы
собственного приготовления либо готовые формы.
     Растворы хлорида натрия, цитрата натрия (изотон) и бикарбоната
натрия (содовый раствор)  готовятся  ежедневно.  Для  приготовления
0,9% хлорида натрия (физиологический раствор) в мерный цилиндр  или
колбу объемом 100 мл наливается 40 - 50 мл  дистиллированной  воды,
добавляется 0,9 г хлорида натрия, который перемешивается до полного
растворения. Затем  доливается  дистиллированная  вода,  количество
раствора доводится до 100 мл. Аналогично готовятся растворы цитрата
и бикарбоната натрия, используя на 100 мл раствора  2,9  г  цитрата
натрия  или  1  г  бикарбоната  натрия  соответственно.  Полученные
растворы   подогреваются   до   +90 ... +95°С   либо  стерилизуются
автоклавированием, хранятся в стерильных флаконах.
     70% раствор спирта готовится путем  добавления  к  73  мл  96%
спирта-ректификата  27  мл  дистиллированной   воды.   Концентрация
раствора проверяется спиртомером.
     Раствор  фурацилина,  используемый  для   обработки   наружных
половых  органов   перед   искусственным   осеменением,   готовится
следующим образом: в 1 л кипящей воды  растворяется  10  г  хлорида
натрия  и  0,2  г  фурацилина,  раствор  фурацилина  охлаждается  и
фильтруется. Хранится раствор  фурацилина  не  более  двух  дней  в
бутылке из темного стекла или в затемненном месте.
     5.3. Дезинфекция сосудов Дьюара  проводится  не  менее  одного
раза в год при соблюдении следующих условий:
     спермодозы перегружаются в сменный сосуд;
     остатки азота сливаются в специально оборудованное место;
     освобожденный  сосуд  Дьюара  ставится   на   отогревание   до
температуры окружающей среды (не менее чем на 2 суток);
     мойка производится горячей водой при температуре не выше 70° С
(возможно применение моющего средства типа ОП-7);
     промытые сосуды Дьюара подвергаются дезинфекции  4%  раствором
перекиси водорода.
     Сосуды  Дьюара  объемом  до  30  л   заливаются   дезраствором
полностью. Канистры и прочие элементы дезинфицируются путем полного
погружения в отдельную емкость с дезраствором.  По  истечении  часа
дезраствор выливается. Сосуд Дьюара,  канистры  и  прочие  элементы
тщательно дважды прополаскиваются кипяченой водой  при  температуре
не выше 70° С и высушиваются.


                           _____________


                                                                                                            Приложение № 1
                                                                                                        к условиям применения
                                                                                                      биотехнологических методов
                                                                                                      искусственного осеменения
                                                                                                       племенных коров и телок,
                                                                                                        утвержденным приказом
                                                                                                          Минсельхоза России
                                                                                                      от 18 марта 2016 г. № 102


                            Признаки половой охоты и времени искусственного осеменения коров и телок

|---|-----------------|-----------------|-----------------------------|-----------------------------------------|--------------|
| N |     Внешние     |   Влагалищные   |         Результаты          |         Результаты ректального          |  Заключение  |
|п/п|     признаки    |    выделения    |  визуального исследования   |              исследования               |              |
|   |     полового    |                 |---------------|-------------|----------------|------------|-----------|              |
|   |    поведения    |                 |   слизистая   | шейка матки |    яичники     |   матка    |шейка матки|              |
|   |                 |                 |   оболочка    |             |                |            |           |              |
|   |                 |                 |   влагалища   |             |                |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 1 |       2         |        3        |       4       |      5      |       6        |     7      |     8     |       9      |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
|                                                             Норма                                                            |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 1 |Признаки         |Обильные         |Гиперемирована,|Канал открыт,|В одном зреющий |Нормальная  |Нормальная |Начало половой|
|   |возбуждения,     |слизистые        |гладкая,       |из него      |фолликул,       |по величине,|по         |охоты,        |
|   |напрыгивание на  |тягуче-жидкие или|блестящая,     |выделяется   |плотной         |в тазовой   |величине,  |осеменять     |
|   |других животных  |слабое ослизнение|слегка отечная,|слизь,       |консистенции    |полости,    |эластичная |через 10 - 12 |
|   |                 |половых губ      |ослизнена      |слизистая    |(диаметр =      |тоничная    |           |часов         |
|   |                 |                 |               |ярко-розовая,|0,5-0,8 см)     |            |           |              |
|   |                 |                 |               |равномерно   |                |            |           |              |
|   |                 |                 |               |окрашена     |                |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 2 |Рефлекс          |Прозрачные или   |Гиперемирована,|Канал открыт,|В одном фолликул|Нормальная, |Нормальная |Полноценная   |
|   |неподвижности,   |слегка мутные,   |легкая         |на шейке     |(диаметр =      |тоничная,   |           |половая охота,|
|   |влажный шерстный |вязкие, тянущиеся|отечность,     |немного      |1,0-2,0 см)     |при         |           |осеменять     |
|   |покров, стертость|шнуром           |хорошо         |пенистой     |с гладкой       |сокращении  |           |              |
|   |крестца          |                 |ослизнена      |слизи.       |поверхностью,   |плотная     |           |              |
|   |                 |                 |               |Выделяется   |ощущается       |            |           |              |
|   |                 |                 |               |слизь по     |флюктуация      |            |           |              |
|   |                 |                 |               |консистенции |жидкости        |            |           |              |
|   |                 |                 |               |куриного     |                |            |           |              |
|   |                 |                 |               |белка        |                |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 3 |Рефлекс          |Красноватые      |Хорошо         |Канал открыт,|В яичнике       |Нормальная  |Нормальная |Половая охота |
|   |неподвижности    |слизистые        |ослизнена, на  |кровянистые  |фолликул        |по          |           |прошла, но    |
|   |отсутствует,     |(метроррагии)    |дне влагалища  |выделения    |(диаметр =      |величине,   |           |задержка      |
|   |шерстный покров  |                 |кровянистая    |             |1,0-2,0 см)     |мягкая,     |           |овуляции,     |
|   |на крестце стерт |                 |слизь          |             |с толстыми      |слабо       |           |осеменять     |
|   |                 |                 |               |             |стенками,       |сокращается |           |немедленно    |
|   |                 |                 |               |             |зыбление        |            |           |              |
|   |                 |                 |               |             |жидкости        |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 4 |Рефлекс          |Слизистые, как   |Слабо          |Канал открыт,|Фолликул зрел   |Нормальная  |Нормальная |"Тихая охота",|
|   |неподвижности    |при нормальной   |гиперемирована,|слизь,       |                |по величине,|           |осеменять     |
|   |отсутствует,     |охоте            |отечная,       |комочки слизи|                |мягкая,     |           |              |
|   |животное         |                 |ослизнена      |на шейке     |                |тонус слабый|           |              |
|   |находится около  |                 |               |             |                |            |           |              |
|   |коров с          |                 |               |             |                |            |           |              |
|   |признаками охоты |                 |               |             |                |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 5 |Рефлекс          |Метроррагии или  |Розовато-синяя,|Канал закрыт |Плотные,        |Нормальная  |Нормальная |Прошла        |
|   |неподвижности    |выделения слабые |ослизнена,     |             |уменьшенные,    |мягкая,     |           |овуляция,     |
|   |отсутствует      |                 |кровянистая    |             |ощущается ямка  |тонус       |           |осеменять     |
|   |                 |                 |слизь          |             |на месте        |слабый      |           |поздно        |
|   |                 |                 |               |             |фолликула       |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
|                                                         Отклонения                                                           |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 6 |Половые          |Небольшие        |Бледно-розовые,|Канал плотно |В яичнике желтое|Увеличена.  |Немного    |Стельная.     |
|   |возбуждения,     |слизистые        |слабое         |закрыт,      |тело            |Стельность  |уплотнена  |"Ложная       |
|   |рефлекс          |                 |ослизнение     |вокруг него  |                |3 - 4       |           |охота",       |
|   |неподвижности    |                 |               |небольшое    |                |месяца      |           |осеменять     |
|   |                 |                 |               |количество   |                |            |           |противопока-  |
|   |                 |                 |               |коричневой   |                |            |           |зано          |
|   |                 |                 |               |слизи        |                |            |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 7 |Рефлекс          |Прозрачные,      |Гиперемирована,|Шейка        |В яичнике зреет |Увеличена,  |Нормальная |Половая охота,|
|   |неподвижности и  |вязкие,          |отечная, хорошо|увеличена,   |фолликул        |отечная.    |или        |но инволюция  |
|   |др. яркие        |обильные         |ослизнена      |канал открыт,|                |Один рог    |увеличенная|матки не      |
|   |признаки охоты   |                 |               |из него      |                |больше      |           |завершена,    |
|   |                 |                 |               |выделяется   |                |другого в   |           |осеменять     |
|   |                 |                 |               |слизь        |                |1,5 - 2 раза|           |противопока-  |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |зано          |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 8 |Рефлекс          |Слизистые, жидкие|Бледно-розовая |Канал открыт |В яичнике зрелый|Отечная,    |Нормальная |Половая охота,|
|   |неподвижности и  |с различными     |или буровато-  |             |фолликул,может  |дряблая,    |или        |но хронический|
|   |другие яркие     |включениями (с   |синюшная, на   |             |присутствовать  |рога        |утолщенная |эндометрит    |
|   |признаки охоты   |еле заметными    |дне могут быть |             |слабо выраженное|одинаковой  |плотная    |(может быть в |
|   |                 |вкраплениями до  |гнойные        |             |желтое тело     |величины и  |           |сочетании с   |
|   |                 |желтых, красных и|слизистые      |             |                |толщины по  |           |цервицитом).  |
|   |                 |гнойных)         |скопления      |             |                |всей длине  |           |Осеменять     |
|   |                 |                 |               |             |                |увеличены,  |           |противопока-  |
|   |                 |                 |               |             |                |атоничны,   |           |зано, лечить  |
|   |                 |                 |               |             |                |иногда      |           |              |
|   |                 |                 |               |             |                |уплотнены   |           |              |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 9 |Рефлекс          |Слизистые, мутные|Тусклая,       |Набухшая     |Зрелый          |Нормальная  |Отечная или|Половая охота,|
|   |неподвижности и  |с различными     |матовая,       |отечная с    |фолликул        |по величине |уплотнена, |но цервицит.  |
|   |другие яркие     |включениями      |слизистая дна  |кровоподтека-|                |и тонусу    |увеличена, |Осеменять     |
|   |признаки охоты   |                 |влагалища      |ми, канал    |                |            |грубая или |противопока-  |
|   |                 |                 |красная,       |открыт или   |                |            |деформиро- |зано, лечить. |
|   |                 |                 |разрыхлена     |заросший     |                |            |ванная,    |При заращении |
|   |                 |                 |               |             |                |            |канал не   |канала шейки  |
|   |                 |                 |               |             |                |            |прощу-     |матки - корову|
|   |                 |                 |               |             |                |            |пывается   |выбраковывают |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 10|Рефлекс          |Прозрачные или   |Набухшая,      |Канал открыт,|В яичнике зреет |Матка       |Нормальная |Половая охота,|
|   |неподвижности и  |мутноватые,      |гиперемирована,|выделение    |фолликул,       |нормальная, |по величине|сальпингит.   |
|   |другие яркие     |вязкие, иногда с |хорошо         |слизи, иногда|яйцеводы оба    |но          |и          |Если          |
|   |признаки охоты   |включениями      |ослизнена      |с включениями|или один        |увеличенная |конституции|сальпингит в  |
|   |                 |                 |               |             |прощупываются   |и тонус,    |           |яйцеводе,     |
|   |                 |                 |               |             |в виде шнура    |иногда      |           |противополож- |
|   |                 |                 |               |             |                |дряблая с   |           |ном фолликулу,|
|   |                 |                 |               |             |                |признаками  |           |и матка в     |
|   |                 |                 |               |             |                |воспаления  |           |норме -       |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |осеменять.    |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |При           |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |двустороннем -|
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |выбраковывают |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|
| 11|Бурные проявления|Обильные,        |Гиперемирована,|Канал открыт,|Разной формы    |Нормальная с|Нормальная |Кисты         |
|   |охоты или        |прозрачные       |отечная,       |слизистая    |(шаровидной,    |признаками  |           |фолликулов.   |
|   |нормальные       |жидкие, иногда с |обильное       |равномерно   |яйцевидной)     |эндометрита |           |Осеменять     |
|   |чаще при         |различными       |ослизнение     |окрашена,    |увеличены,      |            |           |противопока-  |
|   |нарушениях       |включениями      |               |ослизнение   |флюктуируют,    |            |           |зано, лечить. |
|   |периодичности    |                 |               |             |Кисты диаметр   |            |           |Ввести сперму |
|   |циклов           |                 |               |             |= 2 см и более, |            |           |в шейку матки.|
|   |                 |                 |               |             |одиночные или   |            |           |При           |
|   |                 |                 |               |             |множественные   |            |           |множественных |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |кистах в обоих|
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |яичниках -    |
|   |                 |                 |               |             |                |            |           |выбраковывают |
|---|-----------------|-----------------|---------------|-------------|----------------|------------|-----------|--------------|


                                                         _____________


                                                                            Приложение № 2
                                                                        к условиям применения
                                                                      биотехнологических методов
                                                                      искусственного осеменения
                                                                       племенных коров и телок,
                                                                        утвержденным приказом
                                                                          Минсельхоза России
                                                                      от 18 марта 2016 г. № 102


                    Основные способы выявления половой охоты у коров и телок

|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|   Способ    |  Применяемые   |         Наблюдаемые явления при         |     Недостатки      |
|  выявления  |вспомогательные |          наличии половой охоты          |   данного способа   |
|             |    средства    |                                         |                     |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|Визуальный   |Визуальное      |Животные проявляют беспокойство, издают  |Пропуски половой     |
|             |наблюдение за   |звуки, переступают с ноги на ногу,       |охоты у животных с   |
|             |поведением      |оглядываются, у них снижен аппетит. Самки|"тихой" охотой и у   |
|             |животных        |проявляют поисковую реакцию на самца.    |животных с больными  |
|             |                |Животные обнюхивают и облизывают         |конечностями         |
|             |                |эрогенные зоны (вымя, клитор, область    |                     |
|             |                |паха), допускают прыжки на себя и        |                     |
|             |                |спокойно стоят при этом (рефлекс         |                     |
|             |                |неподвижности). В начальный период       |                     |
|             |                |полового возбуждения из половой щели     |                     |
|             |                |истекает слегка беловатая слизь, иногда с|                     |
|             |                |белыми прожилками, которая к середине    |                     |
|             |                |охоты становится прозрачной, а в конце   |                     |
|             |                |охоты начинает слегка мутнеть и          |                     |
|             |                |загустевать                              |                     |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|Вагинальный  |Осмотр влагалища|Наблюдается набухшая и покрасневшая      |Необходимость        |
|             |и шейки матки   |слизистая оболочка влагалища, канал шейки|фиксации животного   |
|             |при помощи      |расслаблен и приоткрыт, из него истекает |при осмотре. У       |
|             |влагалищного    |слизь, которая скапливается на дне       |молодых животных     |
|             |зеркала         |влагалища, а затем вытекает из половой   |раскрытие шейки матки|
|             |                |щели                                     |выражено не сильно.  |
|             |                |                                         |Кроме того, в зимние |
|             |                |                                         |месяцы покраснение   |
|             |                |                                         |стенок влагалища не  |
|             |                |                                         |всегда очевидно      |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|Ректальный   |Прощупывание    |Зрелый фолликул четко выступает на       |Необходимость хорошей|
|             |яичников через  |поверхности яичника. При осторожном      |квалификации         |
|             |прямую кишку    |надавливании пальцем чувствуется движение|оператора и частых   |
|             |(ректу) с целью |фолликулярной жидкости (флюктуация),     |повторений           |
|             |определения     |стенки фолликула мягко вдавливаются.     |манипуляций.         |
|             |степени развития|Незрелый фолликул незначительно выступает|Возможность разрыва  |
|             |предовулятор-   |на поверхности яичника и твердый на ощупь|фолликула и выхода   |
|             |ного фолликула. |                                         |яйцеклетки с ее      |
|             |                |                                         |дальнейшей утратой   |
|             |                |                                         |при неосторожной     |
|             |                |                                         |манипуляции с        |
|             |                |                                         |яичниками            |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|Лабораторный |Прогестероновый |Уровень содержания прогестерона в крови, |Дорогостоящие        |
|             |тест            |моче или молоке животных                 |тест-наборы. Для     |
|             |                |                                         |точной диагностики   |
|             |                |                                         |необходимы           |
|             |                |                                         |многократные         |
|             |                |                                         |исследования.        |
|             |                |                                         |Ложноположительная   |
|             |                |                                         |диагностика          |
|             |                |                                         |стельности при       |
|             |                |                                         |персистентном желтом |
|             |                |                                         |теле                 |
|             |----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|             |Изменения       |Диагностическим признаком служит симптом |Риск травмирования и |
|             |свойств         |"листа папоротника". Он обусловливается  |инфицирования        |
|             |цервикальной    |кристаллизацией солей цервикальной слизи.|животных.            |
|             |слизи           |Степень выраженности этого феномена прямо|Ложноположительные   |
|             |                |пропорциональна эстрогенной активности и |пробы при            |
|             |                |достигает максимума к моменту овуляции   |фолликулярных кистах |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|Инструмен-   |Ультразвуковое  |С помощью прибора для ультразвукового    |Необходимость наличия|
|тальный      |исследование    |сканирования исследуется степень         |дорогостоящей        |
|             |                |развития предовуляторного фолликула      |аппаратуры и         |
|             |                |                                         |обученного персонала |
|             |----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|             |Цветные маркеры |Цветная метка представляет собой         |Высокий уровень      |
|             |                |продольную полосу на кожном покрове      |ложноположительных   |
|             |                |животного размером 5 x 20 см, которая    |определений          |
|             |                |простирается от первого хвостового       |                     |
|             |                |позвонка в краниальном направлении.      |                     |
|             |                |В качестве красящего вещества            |                     |
|             |                |используются цветной мел, краску или     |                     |
|             |                |пасту. На коров и телок, находящихся в   |                     |
|             |                |стадии возбуждения полового цикла,       |                     |
|             |                |вспрыгивают другие животные и частично   |                     |
|             |                |или полностью стирают цветную метку.     |                     |
|             |                |Самок, допускающих вспрыгивания, отбирают|                     |
|             |                |для осеменения не менее 2 раз в сутки    |                     |
|             |----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|             |Педометрия      |Возрастание двигательной активности в 2 и|Невозможно применять |
|             |                |более раз по сравнению с предыдущим днем |при беспривязном     |
|             |                |или ее средним уровнем в стадию          |содержании, выпасе и |
|             |                |уравновешивания полового цикла. Она      |пастбище             |
|             |                |измеряется при помощи механических или   |                     |
|             |                |электронных педометров (шагомеров),      |                     |
|             |                |закрепленных на передней или задней      |                     |
|             |                |конечности. Показания с приборов снимают |                     |
|             |                |2 раза в сутки                           |                     |
|             |----------------|-----------------------------------------|---------------------|
|             |Термометрия     |Увеличение температуры тела не менее чем |Недостоверен         |
|             |                |на 0,2°С по сравнению с температурой за  |                     |
|             |                |предыдущий день или же со средним её     |                     |
|             |                |значением за предыдущие 3 дня. С помощью |                     |
|             |                |специальных термометров измеряется       |                     |
|             |                |температура в прямой кишке, во влагалище |                     |
|             |                |или в молоке, в период его поступления в |                     |
|             |                |доильный аппарат                         |                     |
|-------------|----------------|-----------------------------------------|---------------------|


                                         _____________