"Методические указания по определению остаточных количеств диметоморфа в клубнях картофеля, огурцах и почве жидкостной хроматографией" (утв. Минздравом СССР 29.07.1991 n 6214-91)

Утверждены
Министерством здравоохранения СССР
29 июля 1991 г. N 6214-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ
ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ДИМЕТОМОРФА В КЛУБНЯХ
КАРТОФЕЛЯ, ОГУРЦАХ И ПОЧВЕ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхоза РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. Краткая характеристика препарата
Диметоморф (акробат) - экспериментальный фунгицид, предназначенный для борьбы с фитофторой.
CH O OCH
3 3
\_____/
// \\
\ ___ / O __
--- \ \\ / \
C=CH-C-N O
_____/ \__/
// \\
\ ___ /
/ ---
Cl
Химическое название - (E,Z)-3-/3-(4-хлорофенил)-3-(3,4-
диметоксифенил)акрилоил/морфолин.
Эмпирическая формула: C H ClNO .
21 22 4
Молекулярная масса - 287,9.
Препараты: ЦМЕ 151 поставляется в виде смачивающегося порошка 500 г/кг для бакового смешения с контактными фунгицидами или в качестве готового порошка, который уже включает манкоцеб 90/600 г/кг.
Физические свойства: бесцветное твердое кристаллическое вещество, без запаха, реакции изомеризации происходят в различных растворителях под влиянием света.
Температура плавления - 127 - 148 °C.
Растворимость: легко растворим в дихлорметане, растворим в ацетоне, ацетонитриле и метаноле; плохо растворим в гексане - 0,112 г/л и воде - 0,050 г/л.
Стабильность: хорошая термальная и гидролитическая стабильность.
-5
Давление паров - E,-форма 10 Па при 20 °C.
Препарат малотоксичен. ЛД для мышей составляет 3700 мг/кг, а
50
для крыс 3900 мг/кг, не оказывает кожно-раздражающего действия.
2. Методика определения диметоморфа
2.1. Основные положения
2.1.1. Принцип метода
Метод основан на извлечении диметоморфа ацетоном, очистке переэкстракцией в дихлорметан. Количественное определение производится с помощью жидкостного хроматографа (УФ-детектор).
2.1.2. Метрологическая характеристика метода
Минимальное детектируемое количество 1 нг
Предел обнаружения 0,01 мг/кг
P - размах варьирования 75 - 87%
C - среднее значение определения 82%
S - стандартное отклонение +/- 5,0%
Доверительный интервал среднего при
альфа = 0,95 и n = 5 82,0 +/- 14,0%
Мешающих анализу пестицидов не выявлено.
2.2. Реактивы и растворы
Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.
Гексан, хч, ТУ 6-09-3375-78.
Ацетонитрил, хч, ТУ 6-09-3534-87.
Дихлорметан, хч, ТУ 6-09-3435-86.
Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-77.
Натрий сернокислый, безводный, ч, ГОСТ 4166-76.
Хлороформ, хч, ГОСТ 20015-74.
2.3. Приборы и посуда
Хроматограф жидкостный со спектрофотометрическим детектором марки "Милихром".
Колбы конические, ГОСТ 25336-82, на шлифе, ГОСТ 9737-70.
Колбы круглодонные, ГОСТ 25336-82, на шлифе, ГОСТ 9737-70.
Воронки химические, ГОСТ 25336-82.
Воронки делительные, ГОСТ 25336-82.
Аппарат для встряхивания проб любого типа.
Испаритель ротационный вакуумный любого типа.
Весы технические лабораторные ВЛКТ-500.
Весы аналитические ВЛР-200, ГОСТ 19491-74.
Колбы мерные на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

2.4.1. Отбор и подготовка проб
Отбор проб производится в соответствии с "Унифицированными правилами отбора проб для определения микроколичеств пестицидов в сельскохозяйственной продукции, продуктах питания и объектах окружающей среды", утвержденными заместителем Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.79, N 2051-79.

2.5.1. Экстракция
25 г измельченного материала - картофель, огурцы, почва - помещают в коническую колбу и заливают 100 мл охлажденного ацетона (t ~ 10 - 15 °C). Пробу встряхивают 15 мин. на аппарате для встряхивания. Ацетоновый экстракт фильтруют. Экстракцию повторяют с 80 мл ацетона, остаток промывают 20 мл ацетона. Экстракты объединяют и упаривают на ИР до отсутствия запаха ацетона.
2.5.2. Очистка экстракта
1. К сконцентрированному остатку приливают 100 мл воды, 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и 25 мл дихлорметана (или свежеперегнанного хлороформа). Смесь встряхивают в течение 5 мин. и переносят в делительную воронку. Нижнюю фазу (дихлорметан) фильтруют через 30 г безводного сернокислого натрия. Водную фазу экстрагируют еще дважды в течение 5 мин. 25 мл дихлорметана. Экстракты дихлорметана фильтруют через безводный сернокислый натрий, который затем промывают 15 мл дихлорметана. Фильтраты собирают в круглодонную колбу и концентрируют до сухого состояния на ротационном испарителе.
Иногда очистки перераспределением диметоморфа в дихлорметан оказывается недостаточно. В этом случае дополнительно выполняется следующая очистка.
2. К сухому остатку добавляется 20 мл воды, 30 мл ацетонитрила и 30 мл гексана. Смесь встряхивают в течение 5 мин., затем переносят в делительную воронку. Гексан - верхняя фаза - отбрасывают, водный остаток экстрагируют еще 2 раза в течение 5 мин. 30 мл гексана. Гексан удаляют, а нижнюю фазу экстрагируют 2 раза 25 мл дихлорметана. Фазы дихлорметана фильтруют через 20 г сульфата натрия. Сульфат натрия промывают 10 мл дихлорметана. Из полученного экстракта с помощью ротационного вакуумного испарителя полностью отгоняют растворитель.
2.6. Определение диметоморфа жидкостной хроматографией
Сухой остаток по п. 1 и п. 2 (2.5.2) растворяют в 2 - 4 мл ацетонитрила или дихлорметана в зависимости от используемой колонки.
Измерения выполняются при следующих условиях:
Колонка: 1) Силасорб 600, 5,0 мкм
размер, мм, - 64 x 2
2) Диасорб-130 - фенил/Т, 10 мкм
размер, мм, - 120 x 2
Подвижная фаза: 1) гексан:изопропанол:дихлорметан
(35:20:5) (по объему)
(элюент) 2) ацетонитрил:вода - 60:40 (по объему)
Скорость элюента: 100 мкл/мин.
Длина волны: 240 нм
Объем вводимой пробы: 5 мкл
Диапазон чувствительности: 0,2 - 0,4
Объем удерживания: 1) 264 - 266 мкл
2) 376 - 378 мкл
2.7. Обработка результатов анализа
Содержание пестицида в анализируемой пробе определяется методом соотношения пиков стандартов и анализируемых проб.
Количество диметоморфа рассчитывается по формуле:
H x V x C x V
2 1 3
X = ----------------,
H x V x P
1 2
где:
X - количество препарата в пробе, мг/кг;
C - количество препарата в стандартном растворе, введенном в
хроматограф, мкг/мл;
H - высота пика стандарта, мм;
1
H - высота пика пробы, мм;
2
V - объем стандартного раствора, введенного в хроматограф,
1
мкл;
V - объем анализируемого раствора, введенного в хроматограф,
2
мкл;
V - объем анализируемой пробы, мл;
3
P - навеска пробы, г.
Минимально детектируемая концентрация диметоморфа в анализируемой пробе 0,2 мкг/мл. Линейный диапазон детектирования 0,2 мкг/мл - 4 мкг/мл.
3. Требования техники безопасности
Необходимо соблюдать общепринятые правила предосторожности при работе с токсичными, взрывоопасными и легковоспламеняющимися веществами.