Приказ Министерства сельского хозяйства Российской Федерации от 03.04.2006 № 105

 



                            П Р И К А З

       Министерства сельского хозяйства Российской Федерации
                     от 3 апреля 2006 г. N 105

          Об утверждении Ветеринарных правил лабораторной
                     диагностики гриппа А птиц

         Зарегистрирован Минюстом России 27 апреля 2006 г.
                      Регистрационный N 7761


     В целях  повышения  эффективности  борьбы  с  гриппом птиц и в
соответствии с пунктом 5.2.11 Положения  о  Министерстве  сельского
хозяйства   Российской   Федерации,   утвержденного  постановлением
Правительства Российской Федерации  от  24  марта  2006  г.  N  164
(Собрание  законодательства   Российской   Федерации,  2006,  N 14,
ст. 1543), приказываю:
     Утвердить Ветеринарные правила лабораторной диагностики гриппа
А птиц согласно приложению.


     Министр                                            А.В.Гордеев


                          ______________



     Приложение


                       ВЕТЕРИНАРНЫЕ ПРАВИЛА
              лабораторной диагностики гриппа А птиц

                       1. Область применения

     1.1. Настоящие Правила устанавливают обязательные требования к
организации  лабораторной  диагностики гриппа А птиц (далее - грипп
птиц).
     1.2. Положения  настоящих правил обязательны для выполнения на
территории Российской Федерации  органами  государственной  власти,
предприятиями  или  иными хозяйствующими субъектами,  учреждениями,
организациями,  общественными  объединениями,  независимо   от   их
подчинения и форм собственности, должностными лицами и гражданами.

                        2. Общие положения

     2.1. Диагностические      лабораторные      исследования     и
серологические тесты по определению напряженности поствакцинального
иммунитета    (далее    -    лабораторные    тесты)    проводят   в
специализированных ветеринарных учреждениях.
     2.2. Лабораторная   диагностика   гриппа  птиц  направлена  на
выявление в исследуемых объектах ветеринарного надзора:
     вируса гриппа птиц;
     РНК вируса гриппа птиц;
     антигенов вируса гриппа птиц;
     антител к вирусу гриппа птиц.
     2.3. При    проведении    лабораторных   тестов   могут   быть
использованы методы лабораторных исследований, применяющие:
     тесты, утвержденные в установленном порядке;
     тесты, которые  реализуются  с   использованием   тест-систем,
зарегистрированных в установленном порядке в Российской Федерации.

     3. Обязательные требования по отбору проб для проведения
                      диагностики гриппа птиц

     3.1. Отбор проб крови  и  патологического  материала  проводит
ветеринарный работник, имеющий специальную подготовку.
     3.2. Пробы маркируются и опечатываются.  К пробам  прилагается
сопроводительный  документ,  содержащий  сведения  о  дате  и месте
отбора проб,  юридическом или физическом лице - владельце  птицы  и
месте его нахождения, виде, возрасте птицы и ее состоянии на момент
отбора проб.
     3.3. Для   проведения  исследований  осуществляют  отбор  проб
патологического материала (органы,  ткани головного мозга,  легких,
трахеи, селезенки, участков кишечника, почек, сердца) от павшей или
убитой с диагностической целью птицы.
     3.4. От  каждого  стада  птицы  отбирают для исследований 5-10
трупов или патологический  материал  от  5-10  трупов,  клоакальные
и/или трахеальные смывы от 10-15 голов, 1-10 сборных проб помета от
стада.
     У мелких видов птиц для отбора проб используют свежий помет.
     Пробу помета рекомендуется отбирать из расчета 1 грамм  помета
на  60 точек птичника (выгула или вольеры),  выбранных по диагонали
крест-накрест.
     3.5. Пробы  крови для определения антител к вирусу гриппа птиц
рекомендуется отбирать у 25-30 птиц из стада  (партии),  из  одного
птичника (зала) или одного населенного пункта, местности (водоема).
     Пробы крови  отбирают  из  подкрыльцовой  вены   в   пробирки,
увлажненные   физиологическим   раствором.   Кровь  выдерживают  до
образования сгустка при комнатной температуре или в термостате  при
37°С  в  течение  1-2  часов,  затем обводят иглой или пастеровской
пипеткой,  отслаивая сгусток крови от стенок пробирки,  и оставляют
на 16-18 часов при температуре 2-4°С. Образовавшуюся прозрачную без
признаков гемолиза сыворотку отбирают с помощью пипетки в отдельные
чистые пробирки.
     Отбор крови допускается проводить с помощью иглы и шприца (или
вакуумной пробирки).
     Рекомендуется проводить  центрифугирование  проб   крови   для
получения  сыворотки  в  течение  10-15  минут  при 1000 об/мин для
осаждения свободных эритроцитов.
     Для серодиагностики  используют  парные пробы сывороток крови,
полученные от больных или инфицированных птиц, в начале заболевания
и через 4-10 дней.
     3.6. Пробы  транспортируются  во  влагонепроницаемой  таре,  в
контейнере  с  хладоэлементами или в термосе со льдом.  Допускается
однократное замораживание сывороток.
     При транспортировке      проб      соблюдают     установленные
ветеринарно-санитарные правила и меры безопасности, предъявляемые к
транспортировке  биологических материалов,  содержащих инфекционные
агенты 3 группы патогенности.
     3.7. Если    немедленное    исследование    проб   невозможно,
допускается сохранять образцы на протяжении 4 дней при  температуре
4°С.
     При необходимости    для     увеличения     срока     хранения
диагностические  образцы и/или изолят помещают в морозильную камеру
с температурой -80°С.

      4. Методы и сроки проведения лабораторных исследований

     4.1. Для  установления  диагноза  на  грипп  птиц  допускается
применение следующих методов:
     а) для  выявления  вируса  гриппа  птиц  -  биопроба  на   СПФ
(свободных  от  патогенной  микрофлоры)  -  цыплятах с обязательным
последующим подтверждением специфичности биологической реакции;
     б) для  выделения  вируса гриппа птиц - метод выделения вируса
на СПФ - куриных эмбрионах или в культуре клеток;
     в) для обнаружения антигенов вируса гриппа птиц:
     иммуноферментный анализ  (ИФА)  для  обнаружения  одного   или
нескольких белков вируса;
     иммунопреципитация (двойная   иммунодиффузия   по   Оухтерлони
(далее - РДП) или иммуноэлектроосмофорез (далее - ИЭОФ);
     иммунохроматографические методы (далее - ИХА);
     радиоиммунный анализ (далее - РИА);
     непрямая гем- и латексагглютинация;
     реакция связывания комплемента (далее - РСК);
     г) для    обнаружения    гемагглютинина    (гемагглютинирующей
активности) вируса гриппа птиц:
     реакция гемагглютинации  (далее  -   РГА)   с   подтверждением
специфичности в реакции торможения гемагглютинации (РТГА);
     ИФА на основе моноспецифических сывороток  или  моноклональных
антител к вирусному гемагглютинину;
     д) для обнаружения РНК вируса:
     полимеразная цепная реакция (далее - ПЦР);
     ПЦР с последующим секвенированием ее продуктов;
     Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;
     е) для обнаружения антител к вирусу гриппа птиц:
     ИФА;
     РДП и ИЭОФ;
     ИХА;
     РИА;
     РТГА;
     РСК;
     ж) для    субтипирования    вируса    по    гемагглютинину   и
нейраминидазе:
     РТГА;
     сиквенс к ДНК или ПЦР-продукта;
     ПЦР;
     Дот-блот и блот гибридизация нуклеиновых кислот;
     ИФА на  основе  моноспецифических сывороток или моноклональных
антител к вирусному гемагглютинину;
     з) для     субтипирования     противовирусных    антител    по
гемагглютинину:
     РТГА;
     ИФА на  основе  моноспецифических сывороток или моноклональных
антител к вирусному гемагглютинину.
     4.2. Применение   иных   тестов   допускается   для  получения
предварительных результатов.
     4.3. Методы  проведения  лабораторных исследований реализуются
на основе утверждаемых в установленном порядке  методик  проведения
обязательных диагностических исследований.
     4.4. Сроки      проведения      лабораторных      исследований
устанавливаются  в  зависимости  от  метода исследования и не могут
превышать 1 месяца.


                           _____________