"методы микробиологического контроля продуктов детского, лечебного питания и их компонентов. методические указания. мук 4.2.577-96"(утв. госкомсанэпиднадзором рф 29.10.1996)
до растворения. Содержимое флакона
переносят в стерильную мерную колбу,
вместимостью 100 куб. см, и доводят до метки
стерильной дистиллированной водой при
температуре от 35 до 40 град. С. Получают
раствор пенициллина, содержащий 5000 ЕД/куб.
см.
При использовании флаконов с
пенициллином другой активности, его
растворяют в мерной колбе соответствующей
вместимости до 5000 ЕД/см.
6.2.6.8.
Приготовление раствора стрептомицина
400 мг стрептомицина вносят в стерильную
мерную колбу, вместимостью 100 куб. см,
добавляют 10,0 - 20,0 куб. см стерильной
дистиллированной воды (п. 6.1.6.) при
температуре от 35 до 40 град. С, перемешивают
до растворения, затем доливают стерильной
дистиллированной водой до метки. Массовая
концентрация стрептомицина в растворе 4
г/куб. дм.
6.2.6.9. Приготовление раствора
неомицина
500 мг неомицина вносят в
стерильную мерную колбу вместимостью 100
куб. см, добавляют 10,0 - 20,0 куб. см стерильной
дистиллированной воды (п. 6.1.6.) при
температуре от 35 до 40 град. С, перемешивают
до растворения, затем доливают стерильной
дистиллированной водой до метки. Массовая
концентрация неомицина в растворе 5 г/куб.
дм.
6.2.6.10. Приготовление раствора
левомицетина (хлорамфеникола)
400 мг
левомицетина вносят в стерильную мерную
колбу вместимостью 100 куб. см, добавляют 10,0 -
20,0 куб. см стерильной дистиллированной воды
(п. 6.1.6.) при температуре от 35 до 40 град. С,
перемешивают до растворения, затем
доливают стерильной дистиллированной
водой до метки. Массовая концентрация
левомицетина в растворе 4 г/куб. дм.
6.2.7.
Среды и реактивы для определения
бифидобактерий
6.2.7.1. Гидролизованное
молоко
Обычное или восстановленное
обезжиренное молоко (обрат) доводят до
кипения и кипятят (2 +/- 1) мин., охлаждают до (14
+/- 1) град. С, устанавливают активную
кислотность (7,8 +/- 0,1) ед. pH 10 - 20-процентным
раствором NaOH.
Добавляют панкреатин из
расчета 1 г/куб. дм, предварительно
разведенный в небольшом количестве
нагретой до 44 град. С воды, размешивают,
ставят в термостат и выдерживают при
температуре (40 +/- 1) град. С под ватной
пробкой. В течение первых 2 часов
перемешивание и коррекции активной
кислотности до (7,8 +/- 0,1) ед. pH проводят каждые
(30 +/- 1) мин., в следующие 2 часа - через каждый
час. Через 4 часа от начала гидролиза к смеси
добавляют 1 - 2% хлороформа, закрывают
резиновой или корковой пробкой и снова
ставят в термостат. В течение первых часов
молоко несколько раз перемешивают (пробку
после встряхивания прокалывают для
удаления паров хлороформа). Через 4 часа
доводят активную кислотность до (4,3 +/- 0,1) ЕД
pH 30-процентным раствором уксусной кислоты,
кипятят, помешивая, в течение (15 +/- 1) мин.,
фильтруют через бумажный фильтр. Готовый
гидролизат должен содержать 200 - 300 мг/%
аминного азота. Хранят гидролизат под
хлороформом (1% к объему) при температуре от 4
до 6 град. С.
6.2.7.2. Гидролизатно - молочная
среда
Гидролизованное молоко,
приготовленное по п. 6.2.7.1. разводят питьевой
водой в соотношении 1:1.
В небольшом
количестве разведенного гидролизата
расплавляют агар в количестве 2,5 г на 1,0 куб.
дм приготовляемой среды (в случае
приготовления селективной среды с
неомицином 17 г на 1,0 куб. дм). К остальному
количеству гидролизата добавляют 20 г
пептона и 3,5 г хлористого натрия, смесь
нагревают до температуры (80 +/- 2) град. С,
после чего соединяют с расплавленным
агаром. В смеси устанавливают активную
кислотность (7,4 +/- 0,1) ед. pH, кипятят к течение
(15 +/- 1) мин., дают отстояться, сливают с
осадка, не фильтруя, доливают горячей
дистиллированной водой до заданного объема
и добавляют в нее 10 г лактозы и 0,15 г соляно -
кислого цистина. Сведу разливают в пробирки
высоким столбиком по 10,0 куб. см и
стерилизуют при температуре (112 +/- 1) град. С в
течение (30 +/- 1) мин. с предварительным
подогревом автоклава паром в течение (30 +/- 1)
мин., активная кислотность готовой среды (7,1
+/- 0,1) ед. pH.
6.2.7.3. Кукурузно - лактозная
среда
В небольшом количестве
дистиллированной воды расплавляют агар в
количестве 2,5 г на 1,0 куб. дм приготовляемой
среды. К остальному количеству
дистиллированной воды добавляют 10 г
пептона, 40,0 куб. см водного раствора
кукурузного экстракта, разбавленного 1:6, 6 г
натрия лимонно - кислого трехзамещенного,
0,12 г магния серно - кислого, 2 г калия
фосфорнокислого двузамещенного, смесь
нагревают до температуры (80 +/- 2) град. С,
после чего соединяют с расплавленным
агаром, добавляют 10 г лактозы и 0,15 г
солянокислого цистина или 0,5 г аскорбиновой
кислоты. Цистин предварительно растворяют
в небольшом количестве дистиллированной
воды, в которой устанавливают активную
кислотность (8,4 +/- 0,1) ед. pH с помощью
10-процентного раствора NaOH и нагревают на
водяной бане до полного его растворения.
Смесь доливают горячей дистиллированной
водой до заданного объема и устанавливают
активную кислотность среды (7 +/- 0,1) ед.
